CURVA DI CRESCITA DELLE CELLULE HL60
Nell’attività di laboratorio abbiamo seguito la crescita delle HL60, cellule in sospensione appartenenti ad una linea leucemica umana. Essendo in sospensione è stato possibile contare le cellule con la Camera di Bunker e con il Contatore Automatico. Questi sono i dati
Data |
Tempo in h |
N° di cellule/ml |
27/11/2006 |
0 |
106.000 |
28/11/2006 |
23 |
248.670 |
29/11/2006 |
44 |
204.610 |
30/11/2006 |
65 |
434.620 |
04/12/2006 |
89 |
1.837.800 |
Come si può notare dai dati, le cellule contate il 29/11/2006 corrispondono ad un valore anomalo. Ciò è dovuto ad un mio errore poiché non ho sospeso bene le cellule prima della conta, prelevando un campione troppo povero di cellule, facendo quindi una sottostima,in quanto le cellule dovrebbero essere cresciute rispetto al 28/11/2006.
Ecco la curva di crescita:
Io avevo la fiasca B contenente 2 ml con 800.000 cellule/ml che ho poi messo in 15 ml di terreno dividendole poi in due fiasche una da 5 ml e una da 10 ml, quindi ottengo: = 106.000 cell/ml, e per la conta ho usato sempre la seconda fiasca (da 10 ml) e ciò non è completamente corretto poiché perturbiamo le cellule, ma per comodità abbiamo fatto così.
Anche l’aprire e il chiudere l’incubatore può influire su una curva di crescita imperfetta; infatti la curva di crescita ipotizzata dovrebbe essere così:
Questo è ciò che ci si aspetta: le HL60 dovrebbero avere una fase di latenza molto piccola (in quanto cellule tumorali) seguita da una funzione esponenziale. Il tempo medio di duplicazione dovrebbe essere di @ 23 h
Posso comunque linearizzare la mia curva passando alla scala logaritmica
TEMPO IN ORE |
|
0 |
23 |
44 |
65 |
89 |
n. cellule/mL |
106000 |
248670 |
204610 |
434620 |
1837800 |
Log n.cellule |
5,02 |
5.39 |
5,31 |
5.60 |
6,26 |
Grafico corrispondente:
|